dpph自由基清除率

介绍DPPH自由基清除率：评估物质抗氧化能力的关键指标

在现今的化妆品、食品、药品等领域，抗氧化能力已成为评估物质质量的重要标准之一。DPPH自由基清除率便是衡量这一能力的重要指标。其测定方法背后所依据的，是DPPH自由基与抗氧化剂之间发生的单电子配对反应。接下来，让我们一起深入了解这一指标的测定原理、实验步骤、计算公式以及关键影响因素等要点。

一、测定原理简述

DPPH，全称为1,1-二苯基-2-三硝基苯肼，是一种稳定的自由基。它的乙醇溶液呈现出神秘的紫色，并在特定的波长517–520 nm处展现最大的吸收峰。当抗氧化剂与DPPH自由基发生反应时，神秘的紫色会逐渐褪去，这是因为自由基被清除，导致溶液颜色变浅。这种颜色变化的程度，即吸光度的降低，与抗氧化剂的清除能力有着紧密的联系。换句话说，吸光度下降越明显，该物质的抗氧化能力就越强。

二、实验步骤一览

1. DPPH溶液的配制：我们需要使用无水乙醇来配制浓度为0.04–0.1 mmol/L的DPPH溶液，并妥善避光保存。

2. 样品处理：对待测样品进行溶解或分散在适当的溶剂中，并制备成不同的浓度梯度。

3. 反应混合：取等体积的样品溶液与DPPH溶液进行混合，如2 mL样品溶液与2 mL DPPH溶液混合，然后摇匀并避光静置30分钟。

4. 吸光度测定：离心后取上清液，在特定的波长517–520 nm下进行吸光度的测定。我们需要测定样品组的吸光度（Asample）以及空白组（仅包含DPPH溶液和溶剂）的吸光度（A0）。

三、计算公式介绍

自由基清除率的计算公式为：清除率 = (A0 - Asample) / A0 × 100%。其中，A0代表空白组的吸光度，Asample代表样品组的吸光度。通过这个公式，我们可以计算出物质的DPPH自由基清除率，从而评估其抗氧化能力。

四、关键影响因素

1. 反应时间：确保反应充分进行，通常需要避光静置30分钟。

2. 溶剂选择：乙醇是常用的溶剂，需要确保其纯度以避免杂质干扰。

3. 浓度范围：样品的浓度需要控制在一定的线性响应区间内，以确保结果的准确性。

五、应用场景展望

DPPH自由基清除率的测定方法在多个领域都有着广泛的应用。在化妆品领域，它可以用来评估产品的抗氧化功效，如抗皱、抗衰等。在食品和保健品领域，它可以量化天然提取物或合成成分的抗氧化活性。它在药物开发、材料科学等领域也发挥着重要的作用，用于筛选物质的抗氧化性能。

DPPH自由基清除率的测定方法是一种快速、定量、操作简便且成本较低的评估物质抗氧化能力的方法。通过深入了解其原理、步骤和影响因素，我们可以更好地应用这一方法，为各个领域的研发工作提供有力的支持。